实验通用规则：

1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。

5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。

仪器：

1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）

2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）

3、台式离心机

4、漩涡混匀器

5、微量移液器

样本收集与前处理：

血清（浆）可直接测定。

红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。

动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。

培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。

具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样，不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温

1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

酚 ACS组织相关抗原HLA-B15抗体CDH11/OB-Cadherin  钙粘附蛋白-11抗体

酚 分析标准品,≥99.6%蛋氨腺苷转移酶抗体CDCREL/SEPT5  周期调控相关蛋白1

酚标准溶液 1.0mg/ml，体：化丝裂原活化的蛋白激酶p38β抗体CDCP1/CD318  CD318抗体

酚 用于分子生物学，≥99.5%化自噬微管相关蛋白轻链3抗体CDCA7L  分裂周期相关蛋白JPO2抗体

酚 ≥99.5% (GC)粘蛋白-5B抗体CDCA7  分裂周期相关蛋白

邻二酐 AR粘蛋白-3抗体CDCA5/Sororin  分裂周期相关蛋白5抗体

四氢噻吩 99%鸡马立克氏病火鸡疱疹病抗体CDCA4  分裂周期相关蛋白4抗体

聚烯 熔融指数 12g/10min多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体(C端)CDCA3  分裂周期相关蛋白3抗体

聚烯 熔融指数 35g/10min硝唑抗体CDCA2  分裂周期蛋白2抗体

聚烯 熔融指数 2.2g/10min黑色素瘤相关抗原4抗体CDCA1/Nuf2  分裂周期相关蛋白1抗体

聚烯 熔融指数 0.3g/10min (1.3 @5kg 钙结合蛋白39抗体Cdc7  分裂周期蛋白7抗体

氢化钙 AR，97.0%线粒体抗病信号MAVS蛋白抗体Cdc6  分裂周期蛋白6抗体

氢化钙 98.5%巨噬集落激因子受体抗体CDC45L  分裂周期调控蛋白45抗体

氢化钠 60%肿瘤转移相关蛋白1抗体CDC42  分化周期CDC42蛋白抗体

氢化钠 80%粘蛋白4抗体CDC40  分裂周期同源蛋白40抗体
色胺（Try）含量试剂盒自噬微管相关蛋白轻链3A/3B抗体蜡梅 6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine

黄体激素释放激素/促性腺激素释放激素抗体辣椒,辣椒素(天然提取) Adenine phosphate

LRRC23蛋白抗体辣椒,辣椒素（天然提取标准品） Hypoxanthine

LRRC39蛋白抗体辣蓼（标准品） Guanine

自噬微管相关蛋白轻链3抗体莱苞迪甙A（标准品） Guanine

L3MBTL3蛋白抗体莱苞迪甙C（标准品） Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008

富含亮氨重复蛋白25抗体莱苞迪甙D（标准品） GLT005

白介素31受体a抗体莱苞迪苷G GLT004

LRSAM1蛋白抗体莱菔子（标准品） Asiatic acid

G蛋白α抑制蛋白2抗体Patched/PTCH /FITC  荧光素标记Hh信号转导途径膜蛋白受体抗体IgG

G蛋白偶联受体γ4抗体PTEN/MMAC1(NT)/FITC  荧光素标记一种肿瘤抑制因（N端）IgG