实验通用规则：

1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。

5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。

仪器：

1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）

2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）

3、台式离心机

4、漩涡混匀器

5、微量移液器

样本收集与前处理：

血清（浆）可直接测定。

红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。

动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。

培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。

具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样，不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温

1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

反式 GR,99.0%(剧品)猪血浆激肽释放酶(KLKB1)免疫试剂盒血管生成素相关蛋白6抗体YY1AP1/HCCA2  肝癌相关蛋白2抗体（转录因子YY1结合蛋白1抗体）

正丁  >99.5%(GC)猪血红蛋白(Hb)免疫试剂盒Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体YY1  核转录调节因子YY1抗体

正丁  ACS, ≥99.4%猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒酪氨酸蛋白激酶受体A8抗体YES1  原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体

乙酸丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)猪血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒脂肪酰辅酶A家族成员1抗体YBX-1/YB1  核酸敏感元件结合蛋白1

乙酸乙酯 AR,99%猪血管生成素2(ANG-2)免疫试剂盒芳香烃受体核转录蛋白样2抗体YB1  y-盒结合蛋白1抗体

乙酸乙酯  for HPLC, >99.0%(GC)猪血管生成素1(ANG-1)免疫试剂盒磷酸化芳香N-乙酰化转移酶抗体YAP1  原癌基因Yes相关蛋白1抗体

甲溶液 AR,含10-15% 甲稳定剂猪血管内皮粘附分子1(VCAM-1)免疫试剂盒肌动蛋白结合蛋白1抗体XTP4  乙型肝炎病X蛋白反转录蛋白4抗体

甲 Standard for GC，>99.9%猪血管内皮生长因子(VEGF)免疫试剂盒粘附分子IgG样结构域蛋白2抗体XRCC4  X射线修复交叉互补蛋白4抗体

甲 AR，99.5%猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)免疫试剂盒肌动蛋白结合蛋白DOC6抗体XRCC3  X射线修复交叉互补蛋白3抗体

甲 CP，99.5%猪血管紧张素转化酶2(ACE2)免疫试剂盒AFG3样蛋白2/脊髓小脑共济失调蛋白28抗体XRCC1  X射线修复交叉互补蛋白抗体

甲 AR,无水级猪血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒激活素受体相互作用蛋白1抗体XPC  DNA补充修复XPC蛋白抗体

甲  for HPLC, ≥99.9%猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒固酮类还原酶家族7成员A2抗体XPB/ERCC3  DNA损伤修复酶ERCC3蛋白抗体

甲 农残级, ≥99.9%猪血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒蛋白激酶AKT1,2,3抗体XKR1  膜转运蛋白XK抗体

甲  ≥99.9%(GC)猪旋毛虫IgG抗体免疫试剂盒帕金森病相关蛋白ATP13A2抗体XIAP/BIRC4  X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体

甲 ACS猪胸腺肽β4（Thymosin β4）免疫试剂盒肌侧索硬化蛋白2抗体XDH/Xanthine Oxidase  氧化酶抗体
NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）兔抗羊IgM2'-溴苯乙 2'-Bromoacetophenone >98.0%(GC)Human, Mouse, Rat

兔抗豚鼠IgG4'-溴苯乙 4'-Bromoacetophenone >97.0%(GC)Human, Mouse

兔抗豚鼠IgM3-溴苯酯 Methyl 3-Bromobenzoate >99.0%(GC)Human

兔抗马IgG3-溴苯酯 Methyl 3-Bromobenzoate >99.0%(GC)Human, Mouse

兔抗人IgM4-溴苯 4-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human, Mouse

兔抗猴IgM4-溴苯 4-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human, Mouse

兔抗小鼠IgM2-溴苯 2-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human

兔抗小鼠k链2-溴苯 2-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human

兔抗长爪沙鼠IgG2-溴苯 2-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human, Mouse, Rat

卵泡激素结合蛋白1抗体TRT/FITC  荧光素标记端粒酶抗体IgG

相互作用蛋白FHL2抗体TRT/TERT/PE  荧光素PE标记端粒酶抗体IgG