GST标签蛋白纯化试剂盒
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10 mlGST标签蛋白纯化试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2024-08-26 16:46:07
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上海研生生化试剂有限公司

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产品简介

GST标签蛋白纯化试剂盒储存条件:常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存,长期可放-20℃保存,有效期一年。

详细介绍

产品属性:

产品名称

规格

检测方法

GST标签蛋白纯化试剂盒

10 ml


产品特点:

1. 提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。

2. 采用*的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。

3.适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。

4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。

5.一次可以处理100mg左右的样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。

使用方法:

使用前,最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。

一:匀浆法

 注意:对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。

1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10-15mL的塑料离心管中。

2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。

3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。

4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。

5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

注意事项:

1.如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀,可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟,以去除可见的小碎片。

2.植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物,如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质,可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙酮或冷甲醇,混匀后-20℃放置1小时或过夜,然后4℃,12000rpm离心10min,弃上清后室温风干,然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后,部分蛋白质可能会发生变性,不能再用于活性检测。

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