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上海市所在地
产品名称:天冬酰胺合成酶(ASNS)试剂盒规格
规格:48样、96样、
货号:GOY-016455
检测方法:紫外分光光度法、微板法
产品分类:氮代谢系列
公司产品仅用于科研贮存温度:2~8℃。
本试剂盒保质期:6个月
【实验前溶液配制】
配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复
溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。
配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19
稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量
配制洗涤液。
配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份
浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。
【所用仪器、试剂】
仪 器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装
置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )
微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl
试 剂:乙腈、中性氧化铝
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
豌豆根瘤菌多巴转运(DAT)检测试剂盒
褐黄木耳(琥珀木耳)载脂B(APOB)检测试剂盒
芥黄蜜环菌角18(KRT18)检测试剂盒
BL21(DE3)star转铁(TRF)检测试剂盒
近平滑假丝酵母肥胖抑制(OB)检测试剂盒
中慢生华癸根瘤菌载脂A5(APOA5)检测试剂盒
酿酒酵母α2-HS糖(αHSG)检测试剂盒
鼠李糖乳杆菌抑制βC(INHβC)检测试剂盒
枯草芽胞杆菌一氧化氮合相互作用(NOSIP)检测试剂盒
酿酒酵母半乳凝3(GAL3)检测试剂盒
大豆根瘤菌半乳凝3(GAL3)检测试剂盒
草茎点霉转化生长因子β诱导(TGFβI)检测试剂盒
球孢白僵菌转化生长因子β诱导(TGFβI)检测试剂盒
土壤玫瑰单胞菌凝溶胶(GS)检测试剂盒
玉米大斑凸脐蠕孢菌Ki-67(Ki67P)检测试剂盒
围小丛壳菌脂多糖结合(LBP)检测试剂盒
枯草芽孢杆菌间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒
红拟迷孔菌胰岛样生长因子1(IGF1)检测试剂盒
枯草芽孢杆菌头(NOG)检测试剂盒
奥氏蜜环菌载脂C1(APOC1)检测试剂盒
天冬酰胺合成酶(ASNS)试剂盒规格跨膜受体Notch-1检测试剂盒丝氨/苏氨激PCTK2抗体
3-肌依赖性激-1检测试剂盒二酯7抗体
化脱氢激1检测试剂盒二酯7B抗体
AKT检测试剂盒先天性眼外肌纤维化相关FEOM2抗体
胰腺再生3β检测试剂盒母瘤PHOX2B抗体
白介27α检测试剂盒周期依赖性激5激活因子1抗体
肉棕榈转移检测试剂盒肌动相关2/3复合体亚基5抗体
肉棕榈转移1检测试剂盒浦肯野相关1抗体
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。