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公司产品仅用于科研测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
产品名称:磷脂酶C(PLC)试剂盒说明书
规格:24样、48样、
货号:GOY-016681
检测方法:可见分光光度法、微板法
产品分类:脂肪酸系列
贮存温度:2~8℃。
本试剂盒保质期:6个月
【实验前溶液配制】
配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复
溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。
配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19
稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量
配制洗涤液。
配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份
浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。
【所用仪器、试剂】
仪 器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装
置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )
微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl
试 剂:乙腈、中性氧化铝
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
深红沙雷氏菌3' 端DNA转移标记试剂盒干扰γ(IFNγ)检测试剂盒
金龟子绿僵菌RNA探针聚合标记试剂盒内皮1(EDN1)检测试剂盒
短乳杆菌生物标记试剂专题生长激(GH)检测试剂盒
发酵假丝酵母名称瘦(LEP)检测试剂盒
侧毛壳3' 端DNA生物转移标记试剂盒肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒
甲基杆菌属3' 端DNA生物转移标记鉴定试剂盒转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒
米根霉生物标记封闭溶液Ⅲ型胶原(COL3)检测试剂盒
多球大洋螺菌去垢剂试剂专题白介10(IL10)检测试剂盒
南方散斑壳名称白介18(IL18)检测试剂盒
酿酒酵母10% TWEEN 20溶液白介1β(IL1β)检测试剂盒
乳片球菌95% TWEEN 20溶液白介2(IL2)检测试剂盒
球孢链霉菌10%TWEEN 80溶液白介4(IL4)检测试剂盒
异常汉逊酵母10%Triton X-100溶液白介6(IL6)检测试剂盒
巴氏醋杆菌10%Triton X-114溶液白介8(IL8)检测试剂盒
根癌土壤杆菌10%NP-40溶液表皮生长因子(EGF)检测试剂盒
枯草芽孢杆菌10%Brij-35促生长激释放激(GHRH)检测试剂盒
酿酒酵母10%Brij-58干扰γ(IFNγ)检测试剂盒
立枯丝核菌10%辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷(Octyl-β-D-thioglucopyranoside)基质金属9(MMP9)检测试剂盒
韩国灵芝10%辛基糖苷(Octyl β-D-Glucoside)内皮1(EDN1)检测试剂盒
玫瑰栗色链霉菌10%CHAPS脑钠(BNP)检测试剂盒
磷脂酶C(PLC)试剂盒说明书糖链抗原125检测试剂盒母瘤抑瘤1抗体
糖链抗原153检测试剂盒嗜中性粒胞浆因子1抗体
C型钠尿肽检测试剂盒线粒体复合物NDUFS3抗体
趋化样因子1检测试剂盒雄激受体复合物相关/核受体相互作用抗体
噻唑兰检测试剂盒9号染色体开放阅读框156抗体
L(+)-3-羟脂辅A脱氢检测试剂盒核因子活化T胞浆3抗体
检测试剂盒干转录因子NANOGP8抗体
脂COA脱氢检测试剂盒凋亡抑制抗体