产品概述
部分 Amaxa®Nucleofector®技术
原理 Amaxa
®Nucleofector
®技术是 Lonza(原Amaxa)公司的创新技术,它综合应用传统的电穿孔技术及细胞特异性细胞核转染液,通过调整优化的电转参数(内存转染程序),直接把外源基因导入原代细胞及细胞系的细胞浆和细胞核中。
外源基因直接导入核内 Normal human dermal fibroblasts –neonatal were nucleofected with 2.5 μg TMR-labeled plasmid DNA encoding eGFP. Fixation of cells was performed after 2 hours with 3.5 % PFA. TMR label is shown in (A), GFP fluorescence in (B), DAPI nuclear staining in (C) and a merge of all three fluorescent labels in (D).
泛细胞类型的高效转染
维持细胞生理功能
Human H9 ES cells preserve pluripotency post Nucleofection. H9 cells were transfected by Nucleofection with the pmaxGFP Vector. (Left) Cells analyzed after 24 hours show expression of GFP (green) as well as of the pluri potency markers SSEA4 (red) and Oct4 (purple). The blue signals refer to nuclear staining by DAPI. (Right) The percentage of double- positive cells (GFP/SSEA) was analyzed by flow cytometry. (Data kindly provided by Jennifer Moore, Rutgers University, Piscataway, USA.)
第二部分 Nucleofector 2b单孔细胞核转染仪
产品介绍: 细胞核转染仪是2001年上市的以单孔电转杯为基础的细胞核转染系统,适用于难转染细胞系和原代细胞的高效转染,同时也适用于细菌转化。自上市以来,由于其的技术,高效的转染,稳定的性能,可靠的质量,经过多年的验证和认可,在范围内拥有一批忠实的使用者。在此期间,厂家也多次改进仪器性能,更变仪器型号,由的I型,到IIN型,到IIs型,至现在的2b型。
配套转染试剂盒: - 5种细胞系转染试剂盒,
- 50多种原代细胞转染试剂盒,
- 1种细胞细胞系优化转染试剂盒
操作步骤: 整个操作过程只需四步,非常简单、高效。
第1步:处理细胞,精确计数
第2步:混合DNA、转染液,重悬细胞,加入转染杯
第3步:将转染杯放入转染仪,按键选择相应程序,按"start"键开始转染,10秒钟左右
第4步:取出细胞继续培养、
技术参数:
1、原理:综合应用电穿孔技术和细胞特异性细胞核转染液,可直接将外源基因导入细胞核中。
2、转染程序
2.1 针对不同的细胞类型,内存有优化好的转染程序;
2.2 内存针对1000多种细胞类型的优化程序;
2.3 随着细胞数据库的不断增加,转染程序也不断升级,可提供免费升级服务;
2.4 除了内存真核细胞的优化程序,还内存有细菌的转化程序。
3、转染液
3.1 针对不同的细胞类型,提供不同的配套试剂盒,包括细胞系试剂盒和原代细胞试剂盒;
3.2 含有细胞特异性细胞核转染液,辅助细胞核转染仪,已达到高效的转染效率和高的细胞存活率;
3.3 含有阳性对照质粒PmaxGFP
4、细胞转染数据库
含针对1000多种细胞的转染完整操作数据库,包括细胞处理、转染效率、细胞转染后存活率等各方面验证方案。
5、应用
5.1 能对哺乳动物细胞,特别是原代细胞和悬浮细胞,如神经细胞,干细胞,淋巴细胞等难转染细胞进行快速、高效率的转染,转染过程为非病毒介导,不依赖细胞分裂直接将外源基因导入细胞核的过程。
5.2 可以高效率转染DNA、RNA及siRNA等寡核苷酸进入原代细胞及难转染的细胞系。
6、其他特点
6.1体积小,且轻便,携带方便,可放于无菌细胞室中;
6.2 易于操作,自动化操作,快速便捷;
物理参数: 1、电转参数 | 电流 | 20 VA/fuse 0.4A |
电压 | 230VAC+10%/-20% ;或110VAC+10%/-20% |
电击时间长短 | 根据选用程序定时间长短 |
2、工作频率 | 50-60Hz,自我调节 |
3、体积重量 | 30×23×11cm |
2.8kg |
第三部分 Nucleofector转染平台一览表
| 基础平台 | 高级平台 | 96孔平台 | 高通量平台 |
设备名称 | Nucleofector 2b 单孔细胞核转染仪 | 4D-Nucleofector system 4D细胞核转染系统 | Nucleofector 96-well shuttle 96孔细胞核转染仪 | HT Nucleofector system 高通量细胞核转染系统 |
设备图片 | | | | |
通量 | 低通量(1孔) | 低-中通量(1-16孔) | 低-中通量(1-96孔) | 高通量(384孔) |
体积 | 100μl | 20μl+100μl | 20μl | 20μl |
电极材料 | 铝离子 | 导电聚合物 | 导电聚合物 | 导电聚合物 |
小细胞数(20μl) | -- | 2 x 104 --- 1 x 106 | 2 x 104 --- 1 x 106 | 2 x 104 --- 1 x 106 |
大细胞数(100μl) | 2 x 105 --- 2 x 107 | 2 x 105 --- 2 x 107 | -- | -- |
原位转染 (20μl电转板条) | -- | √ | √ | -- |
与96孔shuttle兼容性 | IIS版本兼容 IIb和IIN不兼容 | √ | -- | -- |