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FKM(Fluorescence Kinetic Microscope)多光谱荧光动态显微成像系统是目前功能强大全面的植物显微荧光研究仪器,是基于FluorCam叶绿素荧光成像技术的显微成像定制系统。它由包含可扩展部件的增强显微镜、高分辨率CCD相机、激发光源组、光谱仪、控温模块以及相应的控制单元和专用的工作站与分析软件组成。它不仅可以进行微藻、单个细胞、单个叶绿体乃至基粒-基质类囊体片段进行Fv/Fm、Kautsky诱导效应、荧光淬灭、OJIP快速荧光响应曲线、QA再氧化等各种叶绿素荧光及MCF多光谱荧光(multicolor fluorescence)成像分析;还能通过激发光源组进行进行任意荧光激发和荧光释放波段的测量,从而进行GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等荧光蛋白、荧光染料以及藻青蛋白、藻红蛋白、藻胆素等藻类*荧光色素的成像分析;更可以利用光谱仪对各种荧光进行光谱分析,区分各发色团(例如PSI和PSII及各种捕光色素复合体等)并进行深入分析。
FKM多光谱荧光动态显微成像系统使荧光成像技术真正成为光合作用机理研究的探针,使科研工作者在藻类和高等植物细胞与亚细胞层次深入理解光合作用过程及该过程中发生的各种变化,为直接研究叶绿体中光合系统的工作机理提供了有力的工具。FKM作为藻类/植物表型和基因型显微研究的双重利器,得到了学界的广泛认可并取得了大量的科研成果。
功能特点
•内置现今叶绿素荧光研究的全部程序,如Fv/Fm、Kautsky诱导效应、荧光淬灭、OJIP快速荧光响应曲线、QA再氧化等,可获得70余项参数。
•配备10倍、20倍、40倍、63倍和100倍专用生物荧光物镜,可以清晰观测到叶绿体及其发出的荧光。
•激发光源组中包括红外光、红光、蓝光、绿光、白光、紫外光和远红光等,通过红蓝绿三色光还可以调出可见光谱中的任何一种色光,能够研究植物/藻类中任何一种色素分子或发色团。
•可进行GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等荧光蛋白、荧光染料的成像分析
•高分辨率光谱仪能够深入解析各种荧光的光谱图。
•控温系统可以保证实验样品在同等温度条件下进行测量,提高实验精度,也可以进行高温/低温胁迫研究。
应用领域
•微藻、大型藻类/高等植物的单个细胞、单个叶绿体、基粒-基质类囊体片段等的显微结构植物光合生理研究
•藻类/植物逆境研究
•生物和非生物胁迫的研究
•藻类/植物抗胁迫能力及易感性研究
•突变体筛选及光合机理研究
•藻类长势与产量评估
•藻类*色素与光合作用关系
•藻类/植物——微生物交互作用研究
•藻类/植物——原生动物交互作用研究
•基因工程与分子生物学研究
测量样品
•植物活体切片
•植物表皮
•植物细胞
•绿藻、蓝藻等各种单细胞和多细胞微藻
•叶绿体提取液
•类囊体提取液
•含有叶绿体的原生动物
工作原理
FKM分析过程中,通过连接在显微镜上的激发光源组和内置在6位滤波轮中的一系列滤波器、分光镜激发植物样品中各种发色团的动态荧光。样品激发出的荧光经显微镜放大后进行荧光光谱分析和荧光动力学成像分析。SM 9000光谱仪通过光纤与显微镜连接,以进行激发荧光光谱分析。安装在显微镜顶部的高分辨率CCD相机则用于荧光动力学成像分析。全部工作过程通过工作站和控制单元按照预先设定好的程序自动进行。测量过程中,可通过温控模块调控藻类、植物细胞等实验样品的温度。蠕动泵可以实现培养藻类的连续测量。
仪器组成
1.增强显微镜
2.高分辨率CCD相机
3.激发光源组
4.SM 9000光谱仪
5.主控制单元
6.工作站及软件
7.控温模块的控制单元
8.6位滤波轮