5637 (膀胱癌细胞)培养
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2024-08-29 15:54:12
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上海研生生化试剂有限公司

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产品简介

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详细介绍

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。

产品名称5637 (膀胱癌细胞)培养
规格1×10⁶cells/T25培养瓶
货号YS-01X6322

产品名称:5637 (膀胱癌细胞)

规格:1×10⁶cells/T25培养瓶

生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

名称5637 (人膀胱癌细胞) (STR鉴定正确)

背景描述5637细胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。

种属

组织来源膀胱;癌

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

细胞类型肿瘤细胞

肿瘤类型膀胱癌细胞

生物安全等级1

生长培养基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

推荐传代比例1:3-1:4

推荐换液频率2~3次/周

倍增时间~24-36 hours

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%;CO2,5%

温度:37℃

致瘤性Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.

注意事项该细胞较难消化,注意延长消化时间,消化到细胞收缩变圆,轻拍培养瓶侧边,细胞可以滑落方可终止消化。

23.jpg

培养:

1.取出小鼠后沥干酒精,放入超净台内,固定在泡沫板上。

2.用镊子提起皮肤,用解剖剪剪开皮肤一个横切口,将皮肤向上撕开,然后剪开肌肉等,暴露出腹腔,在左侧找到脾脏,用弯头眼科镊取出脾脏,置于无菌培养皿中。

3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次,并剔除多余无用的组织。

4.将筛网置于平皿中,脾脏置于筛网上,用弯头镊镊住,轻轻在筛网上进行碾磨,同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。

5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中,离心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。

6.加入10ml培养液,吹打混匀,取样计数。

7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中,轻轻摇晃混匀,在培养瓶上。产品特点:

1.本试剂盒是单溶液式细胞增殖与细胞毒性检测试剂,主要成分包含MTS和一个电子耦合试剂,溶液的稳定性强,反应的灵敏度高。

2.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

3.无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

4.与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。

5.操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。

储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期半年。

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

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