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上海市所在地
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | |
英文名称 | Aspergillus flavusPCR |
货号 | HE30623-R |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
抗内因子抗体试剂盒 质量规格:纯度≥50%,油状液体 包装;25mg
抗内皮细胞抗体试剂盒 质量规格:>95.0%,BR 包装;1g
抗麦角蛋白试剂盒 质量规格:>95.0%,BR 包装;25g
抗麦胶蛋白抗体试剂盒 质量规格:>98%,BR,单合物 包装;5g
抗麦胶蛋白抗体试剂盒 质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养 包装;25g
抗麦胶蛋白试剂盒 质量规格:HPLC>98.5%,标准品 包装;5g
抗卵子抗体elisa试剂盒 质量规格:>99% 包装;1g
抗卵巢抗体试剂盒 质量规格:>98%,分析标准品 包装;5g
抗流行性出血热病毒抗体IgM试剂盒 质量规格:≥40% 包装;1g
抗流行性出血热病毒抗体试剂盒 质量规格:≥50%,BR 包装;25g
抗磷脂酰乙醇胺抗体试剂盒 质量规格:≥90% 包装;5g
抗磷脂酰乙醇胺抗体试剂盒 质量规格:>98%,高含量易分解 包装;5g
抗磷脂酰乙醇胺抗体试剂盒 质量规格:≥98.0%,BR,L构型 包装;1g
抗磷脂酰酸抗体试剂盒 质量规格:≥98.0%,标准品,L构型 包装;5g
抗磷脂酰丝氨酸抗体试剂盒 质量规格:≥98% 包装;25g
抗磷脂酰甘油抗体试剂盒 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;100g
抗磷脂酰甘油抗体试剂盒 质量规格:≥99.0%,BR 包装;25g
黄曲霉PCR检测试剂盒Thermoactinomyces│sp. 中文名称:高温放线菌属种属:Thermoactinomyces│sp.分离基物:高温大曲曲块提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:904生长条件:55℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%
Hafnia│alvei 中文名称:蜂房哈夫尼菌种属:Hafnia│alvei提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:测定赖氨酸。培养方法培养基:CM0180生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Bacillus mucilaginosus 中文名称:胶冻样芽孢杆菌种属:Bacillus mucilaginosus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:细菌肥料培养方法培养基:营养肉汁琼脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生长条件:30℃,好氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Sphingomonas sanxanigenens 中文名称:胞外多聚物鞘氨醇单胞菌种属:Sphingomonas sanxanigenens形态菌体呈球状至杆状,单个、成对或呈短链状排列,革兰氏阴性。提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:黄原胶。培养方法培养基:CM0002生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Gibberella fujikuroi 中文名称:藤仓赤霉种属:Gibberella fujikuroi提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产赤霉素。培养方法培养基:综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。生长条件:28℃,好氧存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%
Lactobacillus│sanfrancisco 中文名称:旧金山乳杆菌种属:Lactobacillus│sanfrancisco分离基物:稀奶油提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0006生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Lactobacillus│paracasei subsp. paracasei 中文名称:副干酪乳杆菌副干酪亚种种属:Lactobacillus│paracasei subsp. paracasei分离基物:益生菌品提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:发酵酸乳培养方法培养基:CM0006生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Vibrio│mimicus 中文名称:拟态弧菌种属:Vibrio│mimicus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究、质量控制。培养方法培养基:CM0002生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:99%