一、问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？

　　答：关于漂移问题：

　　1.温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定

　　2.流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等

　　3.柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡

　　关于快速变化问题

　　1.流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定

　　2.泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。

　　3.流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合

　　二、问：液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？

　　答：1.筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。

　　2.存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子

　　三、问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法

　　答：1.样品量不足，解决办法为增加样品量 医.学教育网搜集整理

　　2.样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子

　　3.样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器

　　4.检测器衰减太多。调整衰减即可。

　　5.检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数

　　6.检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。

　　7.检测池中有气泡。解决办法为排气。

　　8.记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。

　　9.流动相流量不合适。调整流速即可。

　　10.检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

　　四、问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？

　　答：原因可能有：

　　1.泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；

　　2.比例阀失效，更换比例阀即可；

　　3.泵密封垫损坏，更换密封垫即可；

　　4.溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；

　　5.系统检漏，找出漏点，密封即可；

　　6.梯度洗脱，这时压力波动是正常的。