教你绘制ELISA标准曲线图
时间:2016-11-17 阅读:1612
每个ELISA试验都要做标准曲线,实验新手刚接触ELISA试剂实验的时基本上都是不知所措,尤其是实验做完后需要分析数据绘制标准曲线图更是茫然。鉴于经常有实验新手客户向我司技术部反映标准曲线图绘制问题,我司技术部根据自身多年的工作经验详细整理了绘制标曲的步骤流程,供广大新老客户参考。
1、拟和曲线:
输入*行: 浓度值, 如0 10 50 100 400
输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型"中选择“xy散点图";在“子图表类型"中选择“折线散点图",按“下一步";选择“系列产生在行",按“下一步";数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。
单击曲线,按右键,选择“添加趋势线",在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面说的方法: 双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。
2、计算浓度:
*次实验:
标准曲线为:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例,已知OD值,计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
a=4E-05;b= -0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根)) /(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
通用公式为:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)