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大鼠环磷酸鸟苷ELISA 检测试剂盒操作步骤

时间:2012-09-07      阅读:864

大鼠环磷酸鸟苷ELISA 检测试剂盒操作步骤

操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

大鼠环磷酸鸟苷ELISA 检测试剂盒


每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案
标准品浓度(nmol/L)
A 800 800 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
B 400 400 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
C 200 200 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
D 100 100 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
E 50 50 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
F 25 25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

大鼠环磷酸鸟苷ELISA 检测试剂盒
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

 

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