简述牛雌二醇ELISA 试剂盒内容及配制
时间：2012-08-09 阅读：856
简述牛雌二醇ELISA 试剂盒内容及配制
试验原理：
Estradiol试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Estradiol浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Estradiol和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。Estradiol的浓度呈比例关系。
牛雌二醇ELISA 试剂盒
颜色的深浅和样品中
试剂盒内容及其配制：
试剂盒成份
| | 96孔配置 | 48孔配置 |
| 96/48人份酶标板 | 1块板（96T） | 半块（48T） |
| 塑料膜板盖 | 1块 | 半块 |
| 标准品：400pmol/L | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） |
| 空白对照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） |
| 标准品稀释缓冲液 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） |
| 生物素标记的抗Estradiol抗体 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） |
| 亲和链酶素-HRP | 1瓶（12ml） | 1瓶（6.0ml） |
| 洗涤缓冲液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） |
| 底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
| 终止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
自备材料：
1． 蒸馏水。
2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振荡器及磁力搅拌器等。
4． 安全性： 1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。牛雌二醇ELISA 试剂盒 2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 试剂的准备： 1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行： 400
| pmol/L | （6号标准品） | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
| 200 pmol/L | （5号标准品） | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
| 100 pmol/L | （4号标准品） | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
| 50 pmol/L | （3号标准品） | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
| 25 pmol/L | （2号标准品） | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
| 12.5 pmol/L | （1号标准品） | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
| 0 pmol/L | （空白对照） | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
试剂盒性能：
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。牛雌二醇ELISA 试剂盒
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。