简述牛雌二醇ELISA 试剂盒内容及配制
时间:2012-08-09 阅读:885
简述牛雌二醇ELISA 试剂盒内容及配制
试验原理:
Estradiol试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Estradiol浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Estradiol和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。Estradiol的浓度呈比例关系。
牛雌二醇ELISA 试剂盒
颜色的深浅和样品中
试剂盒内容及其配制:
试剂盒成份
| 96孔配置 | 48孔配置 |
96/48人份酶标板 | 1块板(96T) | 半块(48T) |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 |
标准品:400pmol/L | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) |
生物素标记的抗Estradiol抗体 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(12ml) | 1瓶(6.0ml) |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
自备材料:
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
4. 安全性: 1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。牛雌二醇ELISA 试剂盒 2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 试剂的准备: 1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行: 400
pmol/L | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
200 pmol/L | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100 pmol/L | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50 pmol/L | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25 pmol/L | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
12.5 pmol/L | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0 pmol/L | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
试剂盒性能:
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。牛雌二醇ELISA 试剂盒
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。