自动化兼容  – 安全处理 – 无表面附着 

以前的 GravityPLUS ™悬滴系统。

世界且的 96 孔形式的悬滴板，具有自动化兼容的顶部装载。

• 通过的 SureDrop™ 入口从顶部加载细胞悬液，该入口设计用于高度均匀和稳定的悬滴

• 在长期培养中重力辅助形成均匀的球体/有机体形态和功能，每孔产生一个球体

• 适用于许多细胞类型，包括通常不会在超低附着表面上形成球状体或类器官的细胞

包含 10 个 Akura™ PLUS 悬滴板和 10 个 Akura™ 96 球体板，独立包装，由聚苯乙烯和环烯烃聚合物制成，无菌，包括盖子。  

问：您能否推荐用于生成球体的细胞悬液的细胞浓度？ 

答：对于长期生长分析，我们建议从低细胞数开始（每滴 40 µl 250 – 500 个细胞）。如果需要使用非增殖细胞或快速生产更大的球体，请从更高的数量开始（每 40 µl 2500+ 个细胞）。通常，我们建议在使用新细胞类型时尝试不同的浓度来确定您的范围。 

问：什么是 SureDrop™ 进样口？ 

答：InSphero 的 Akura™ PLUS 悬滴板采用正在申请的 SureDrop™ 微技术，可以精确分配到悬滴中和从悬滴中吸取。由于液滴体积与接种细胞数量相对应，Akura™ PLUS 悬滴板生产的球体显示出出色的尺寸一致性，整个 96 孔板的直径变化不超过 5%。为确保 SureDrop™ 密封，重要的是移液器吸头与孔表面充分接触，以确保的液体转移和均匀的液滴形成。弹簧加载的孔弹性调整，以确保在移液过程中施加向下压力时保持接触。  

问：Akura™ PLUS 悬滴板每滴的体积是多少？ 

答：为了获得且稳定的悬滴，轻轻地将 40 µl（移液速度 < 50 µl/sec）的细胞悬液注入 Akura™ PLUS 悬滴板的每个孔中。重要提示：要生成大小和细胞组成均一的球体，必须在接种到 Akura™ PLUS 悬滴板之前轻轻上下吹打，以确保细胞分布均匀。 

问：为什么您建议在转移球体之前预润湿 Akura™ 96 板孔？ 

答：在转移之前需要预先润湿 Akura™ 96 板的孔，以防止包含气泡。为此，通过将放入孔中，将 40 μl 的聚集介质应用于每个孔。通过将放在井的上腔的壁架上来去除预润湿溶液。吸出培养基，直到从每个孔中取出。微量 (< 5-7 µl) 可能残留在腔室底部。 

问：如何将球体转移到接收器 (Akura™ 96) 板中？ 

答：通过将三个销钉定位到 Akura™ 96 板顶部表面上的相应孔中，将带有 Akura™ PLUS 板条的框架放在 Akura™ 96 板上。然后，Akura™ PLUS 板下方的液滴将与下方 Akura™ 96 板的孔对齐。使用缓慢的移液速度 (≤ 10 µl /sec)，通过 Akura™ PLUS 悬滴板孔的入口加入 70 µl 培养基或缓冲液。确保移液器吸头与孔入口紧密接触。 

问：防止板外孔蒸发的方法是什么？ 

答：外排（周边）孔的蒸发是大多数低容量培养平台常见的现象，因此需要特别注意保持适当的湿度控制。尽管遵循以下建议时，悬滴（Akura™ PLUS 板）的外排或 Akura™ 96 板的孔中蒸发是可能的。如果不加以控制，显着的蒸发会导致培养基成分（例如血清、盐）的浓缩或沉淀，从而影响球状体的形成或健康，并可能在长期的过程中改变培养基中化合物/添加剂的有效浓度。学期实验。为在使用 Akura™ PLUS 悬滴系统时提供的湿度控制，我们建议如下： 

• 使用湿度控制良好（>95% 相对湿度）的培养箱，并在保持和尽量减少湿度损失方面进行实践（例如尽量减少培养箱门的打开和关闭）。

• 在 Akura™ PLUS 悬滴板中形成微组织期间，始终使用底板中提供的加湿器垫，并用无菌 0.5x 稀释的 PBS 浸泡。这是在悬滴中微组织成熟期间保持 Akura™ PLUS 板中适当湿度的关键。

• 对于湿度控制不佳的培养箱，可将低渗缓冲溶液（例如 0.2× PBS）应用于加湿垫。

• 对于 Akura™ 96 板中的培养，建议在每个孔中至少加入 50-70 µl 培养基，如果培养箱湿度控制是一个持续存在的问题，可以增加到最多 80 µl。如果条件需要，也可以将介质交换频率增加到每隔一天或每天一次。 

• 我们建议使用 InSphero Incubox (InSphero CS-10-001-00) 来减少使用低频介质交换进行长期研究时的边缘效应。Incubox 将于 2021 年第四季度推出，可在 上购买。