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面议H661-GFP荧光标记细胞株胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | H661-GFP |
价格 | 来电可享受优惠 |
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
英文名称Humaissue-typePlasminogenActivator(t-PA)人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 双(2-甲酰苯基)醚(>98.0%(GC)) Bis(2-formylphenyl) Ether 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称humaM-Ab人抗甲状腺微粒体抗体(TM-Ab)规格:96T/48T 1,3-双(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 质量规格:>98.0%(GC)(T)
英文名称Human1,25-dihydroxyvitaminD3人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)规格:96T/48T 4-氨基-4'-氯二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether 质量规格:>97.0%(GC)(T)
英文名称Human14-3-3protein人14-3-3蛋白(14-3-3pro)规格:96T/48T 4-氯-4'-羟基二苯醚(>95.0%(GC)) 4-Chloro-4'-hydroxydiphenyl Ether 质量规格:>95.0%(GC)
英文名称Human15-lipoxygenase人15-脂加氧酶(15-LO)规格:96T/48T 4,4'-二硝基二苯醚(>99.0%(GC)) 4,4'-Dinitrodiphenyl Ether 质量规格:>99.0%(GC)
英文名称Human17-Hydroxycoicosteroids人17-羟皮质类(17-OHCS)规格:96T/48T 3,4'-二氨基二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 3,4'-Diaminodiphenyl Ether 质量规格:>97.0%(GC)(T)
英文名称Human17-KS人17-同皮质类(17-KS)规格:96T/48T 1,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC)) 1,4-Diphenoxybenzene 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称Human25(OH)D3人25羟维生素D3(25(OH)D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 4,4'-二羧基二苯醚(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC)(T)
英文名称Human25-HVD人25-羟基维生素D(25-HVD)规格:96T/48T 4,4'-二羟基二苯醚(>98.0%(GC)) 4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称Human-3人神经营养素3(-3)规格:96T/48T 2,2'-二羟基二苯醚(>98.0%(GC)) 2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC)
RhoA鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 波尼松龙-d6 Prednisolone-d6 质量规格:美国进口
RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA试剂盒兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 波尼松龙21-半琥珀酸钠盐 Prednisolone 21-hemisuccinate sodium salt 质量规格:美国进口
小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 ,英文名: ACTH ELISA Kit 6α-甲基波尼松龙21-醋酸 6α-Methylprednisolone 21-Acetate 质量规格:美国进口
大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA检测试剂盒Ratperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 96T/48T 喹硫平富马酸盐标记-d8 Quetiapine Hemifumarate Labeled d8 质量规格:美国进口
人β细胞素(BTC)免疫试剂盒 Human beta cellulin,BTC ELISA Kit 喹硫平二聚体杂质 Quetiapine Dimer Impurity 质量规格:美国进口
英文名称Mousehemeoxygenase-2ELISAKit小鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T 羟基喹硫平杂质 Quetiapine Hydroxy Impurity 质量规格:美国进口
RhoB鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 N-氧基喹硫平 Quetiapine N-Oxide 质量规格:美国进口
rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISA试剂盒兔子Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 喹硫平磺酸盐 Quetiapine Sulfoxide 质量规格:美国进口
小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 7-苄氧基-N-des{[2-(2-羟基)乙氧基]乙基} 喹硫平 7-Benzyloxy-N-des{[2-(2-hydroxy)ethoxy]ethyl} Quetiapine 质量规格:美国进口
Rat coisol (Coisol) ELISA Kit 大鼠皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒 喹硫平 quetiapine 质量规格:美国进口
4-氯-4'-羟基二苯醚(>95.0%(GC)) 4-Chloro-4'-hydroxydiphenyl Ether 质量规格:>95.0%(GC) 英文名称Human14-3-3proteinELISAKit人14-3-3蛋白(14-3-3pro)规格:96T/48T
4,4'-二硝基二苯醚(>99.0%(GC)) 4,4'-Dinitrodiphenyl Ether 质量规格:>99.0%(GC) 英文名称Human15-lipoxygenaseELISAKit人15-脂加氧酶(15-LO)规格:96T/48T
3,4'-二氨基二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 3,4'-Diaminodiphenyl Ether 质量规格:>97.0%(GC)(T) 英文名称Human17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT人17-羟皮质类(17-OHCS)规格:96T/48T
1,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC)) 1,4-Diphenoxybenzene 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称Human17-KSELISAKIT人17-同皮质类(17-KS)规格:96T/48T
4,4'-二羧基二苯醚(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC)(T) 英文名称Human25(OH)D3ELISAKit人25羟维生素D3(25(OH)D3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
4,4'-二羟基二苯醚(>98.0%(GC)) 4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称Human25-HVDELISAKit人25-羟基维生素D(25-HVD)规格:96T/48T
2,2'-二羟基二苯醚(>98.0%(GC)) 2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称Human-3ELISAKit人神经营养素3(-3)规格:96T/48T
4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称Human-4ELISAKit人神经营养素4(-4)规格:96T/48T
4-叔丁基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-tert-Butyldiphenyl Sulfide 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称Human6-keto-prostaglandinelisakit人6-同-前列腺素(6-keto-prostaglandin)规格:96T/48T
双(4-羟苯基)硫醚(>98.0%(GC)) Bis(4-hydroxyphenyl) Sulfide 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称Human8-hydroxy-2-deoxyguanosineELISAKit人8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)规格:96T/48T
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。