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一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | SMMC7721-GFP |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
犬血栓前体蛋白(TpP)免疫试剂盒 Canine thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 4A分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:60-80目,气相、液相色谱柱
犬血栓素B2(TXB2)ELISA检测试剂盒CanineThromboxaneB2,TX-B2 96T/48T 4A分子筛(80-100目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:80-100目,气相、液相色谱柱
犬血栓素B2(TXB2)免疫试剂盒 Canine Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit 分子筛4A(2mm-3mm,干燥剂用 ) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:2mm-3mm,干燥剂用
犬血栓调节蛋白(TM)ELISA检测试剂盒Caninethrombomodulin,TM 96T/48T 分子筛4A(beads,4-8 mesh ) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:beads,4-8 mesh
犬血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒 Dog thrombomodulin,TM ELISA Kit 分子筛4A( beads,8-12 mesh) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:beads,8-12 mesh
犬血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒 Dog fibrinogen,Fbg ELISA Kit 分子筛, 5 Å(20-40目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 5 Å 质量规格:20-40目,气相、液相色谱柱
犬血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒 Canine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 分子筛, 5 Å(40-60目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 5 Å 质量规格:40-60目,气相、液相色谱柱
犬叶酸(FA)ELISA检测试剂盒CanineFolicacid,FA 96T/48T 分子筛, 5 Å(60-80目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 5 Å 质量规格:60-80目,气相、液相色谱柱
犬叶酸(FA)免疫试剂盒 Canine Folic acid,FA ELISA Kit 分子筛, 5 Å(80-100目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 5 Å 质量规格:80-100目,气相、液相色谱柱
犬胰蛋白酶(ypsin)免疫试剂盒 Canine ypsin ELISA Kit 分子筛, 5 Å(干燥剂用) Molecular sieves, 5 Å 质量规格:干燥剂用
RHODAMINE110蛋白标记试剂盒3(200微克/) 1-β-D-呋核亚硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酸甲酯 1-β-D-Ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic Acid Methyl Ester 质量规格:美国进口
RabbitCollagenaseIELISA试剂盒兔子胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒规格:96T/48T 3-羧氨基利巴韦林盐酸盐 Viramidine Hydrochloride 质量规格:美国进口
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 25-O-去乙酰基利福布汀 25-O-Deacetyl Rifabutin 质量规格:美国进口
Rat coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 大鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA试剂盒 N-去异丁基-N-丙基利福布汀 N-Desisobutyl-N-propyl Rifabutin 质量规格:美国进口
Humanapelin12,AP12ELISAKit 人apelin12(AP12)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 25-去乙酰基利福喷汀 25-Desacetyl Rifapentin 质量规格:美国进口
HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISA试剂盒人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒规格:96T/48T 利鲁唑-13C,15N2 Riluzole-13C,15N2 质量规格:美国进口
植物种子活性叶绿体分离试剂盒20 N-羟基利鲁唑 N-Hydroxy Riluzole 质量规格:美国进口
Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)ELISA试剂盒规格:96T/48T 地拉罗司-d4 Deferasirox-d4 质量规格:美国进口
小鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒 ,英文名: H ELISA Kit 9-酮基利培酮 9-Keto Risperidone 质量规格:美国进口
大鼠脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒RatBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 96T/48T 6-去氟-6-羟基利培酮 6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone 质量规格:美国进口
4A分子筛(80-100目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:80-100目,气相、液相色谱柱 犬血栓素B2(TXB2)ELISA检测试剂盒CanineThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 96T/48T
分子筛4A(2mm-3mm,干燥剂用 ) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:2mm-3mm,干燥剂用 犬血栓素B2(TXB2)免疫试剂盒 Canine Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
分子筛4A(beads,4-8 mesh ) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:beads,4-8 mesh 犬血栓调节蛋白(TM)ELISA检测试剂盒Caninethrombomodulin,TMELISAKit 96T/48T
分子筛4A( beads,8-12 mesh) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:beads,8-12 mesh 犬血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒 Dog thrombomodulin,TM ELISA Kit
分子筛, 5 Å(20-40目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 5 Å 质量规格:20-40目,气相、液相色谱柱 犬血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒 Dog fibrinogen,Fbg ELISA Kit
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分子筛, 5 Å(干燥剂用) Molecular sieves, 5 Å 质量规格:干燥剂用 犬胰蛋白酶(ypsin)免疫试剂盒 Canine ypsin ELISA Kit
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