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面议SW620-LUC荧光标记细胞株胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | SW620-LUC |
价格 | 来电可享受优惠 |
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA试剂盒 ,英文名: Lpa ELISA Kit 4,4'-双(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N)) 4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 质量规格:>96.0%(N)
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA检测试剂盒Mouselipoproteinα,Lp-α 96T/48T 4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N)) 4,4'-Diamyloxyazoxybenzene 质量规格:>95.0%(N)
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-α ELISA Kit 4,4'-二丁氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dibutoxyazoxybenzene 质量规格:
小鼠脂蛋白关联0脂酶A2(LpPLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit 4,4'-二正辛氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N)) 4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene 质量规格:>95.0%(N)
小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit 4,4'-二壬氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene 质量规格:
小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-PL-A2 ELISA Kit 4'-(反-4-戊基环己基)二苯基-4-甲腈(>98.0%(GC)) 4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile 质量规格:>98.0%(GC)
小鼠脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA试剂盒 ,英文名: LIPD ELISA Kit 4-戊氧基(>98.0%(GC)) 4-Amyloxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC)
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA检测试剂盒Mouselipoproteinlipase,LPL 96T/48T 4-丁氧基(>98.0%(GC)) 4-Butoxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC)
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 ,英文名: LPL ELISA Kit 4-丁基(>95.0%(GC)) 4-Butylbenzaldehyde 质量规格:>95.0%(GC)
小鼠脂多糖(LPS)ELISA试剂盒 ,英文名: LPS ELISA Kit 4-苄氧基(>98.0%(GC)) 4-Benzyloxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC)
小鼠0酸核糖基转移酶1(HP1)ELISA试剂盒 ,英文名: HP1 ELISA Kit α-羟基它莫西芬 α-Hydroxy Tamoxifen 质量规格:美国进口
人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA检测试剂盒Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit 96T/48T N-去甲基-4'-羟基它莫西芬 N-Desmethyl-4'-hydroxy Tamoxifen 质量规格:美国进口
大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)免疫试剂盒 Rat ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit N-去甲基它莫西芬盐酸盐 N-Desmethyl Tamoxifen Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatOsteocalcinELISAKit大鼠骨桥素(Osteocalcin)规格:96T/48T (E)-4-羟基-N-去甲基它莫西芬 (E)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen 质量规格:美国进口
酵母氢/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 4-乙酰氧基它莫西芬 4-Acetoxy Tamoxifen 质量规格:美国进口
ELISAKiLN人松弛肽/松弛素规格:48T/96T N-去甲基-4-羟基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物) N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture) 质量规格:美国进口
小鼠级淋巴组织趋化因子6Ckine(CCL21)ELISA试剂盒 ,英文名: CCL21 ELISA Kit (Z)-4-羟基-N-去甲基它莫西芬 (同分) (Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers) 质量规格:美国进口
鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA检测试剂盒ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit 96T/48T N-去甲基-4-羟基它莫西芬 (大约1:1 E/Z 混合物) N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture) 质量规格:美国进口
人Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫试剂盒 Human C-telopeptide of type Ⅱ collagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit (Z)-4-羟基它莫西芬 (Z)-4-Hydroxytamoxifen 质量规格:美国进口
英文名称MouseCollageypeIELISAKit小鼠I型胶原(CollageypeI)ELISA试剂盒规格:96T/48T 拉宁A2 Teicoplanin A2 质量规格:美国进口
4,4'-二正辛氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N)) 4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene 质量规格:>95.0%(N) 小鼠脂蛋白关联0脂酶A2(LpPLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit
4,4'-二壬氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene 质量规格: 小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit
4'-(反-4-戊基环己基)二苯基-4-甲腈(>98.0%(GC)) 4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile 质量规格:>98.0%(GC) 小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-PL-A2 ELISA Kit
4-戊氧基(>98.0%(GC)) 4-Amyloxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC) 小鼠脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA试剂盒 ,英文名: LIPD ELISA Kit
4-丁氧基(>98.0%(GC)) 4-Butoxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC) 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA检测试剂盒Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit 96T/48T
4-丁基(>95.0%(GC)) 4-Butylbenzaldehyde 质量规格:>95.0%(GC) 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 ,英文名: LPL ELISA Kit
4-苄氧基(>98.0%(GC)) 4-Benzyloxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC) 小鼠脂多糖(LPS)ELISA试剂盒 ,英文名: LPS ELISA Kit
4-癸氧基(>97.0%(GC)) 4-Decyloxybenzaldehyde 质量规格:>97.0%(GC) 小鼠脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒 ,英文名: LPS ELISA Kit
4-(己氧基)(>98.0%(GC)) 4-(Hexyloxy)benzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC) 小鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 ,英文名: LBP ELISA Kit
4-庚氧基(>98.0%(GC)(T)) 4-Heptyloxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%(GC)(T) 小鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒 ,英文名: FAS ELISA Kit
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。