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一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | Hela-LUC |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Hederacolchiside E Hederacolchiside E 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 ,英文名: PF/PFP ELISA Kit 3-O-β-D-葡萄糖( 1→3)- a -L-鼠李糖(1→2)- a-L-阿拉伯糖 齐墩果酸– 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠穿孔素1(PRF1)ELISA试剂盒 ,英文名: PRF1 ELISA Kit 3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羟基羽扇豆20(29)-烯-28–酸- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠垂草扁桃酸(VMA)ELISA试剂盒 ,英文名: VMA ELISA Kit 3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒 ,英文名: ADCYAP1 ELISA Kit D-果糖-6-二钠盐 D-Fructose-6-phosphate disodiuM salt 质量规格:>95%,BR
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒 ,英文名: PACAP ELISA Kit 白头翁皂苷B Pulchinenoside B 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒 ,英文名: E2 ELISA Kit 3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羟基羽扇豆20(29)-烯-28–酸;白头翁皂苷D V 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠雌二醇受体(ER)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 罗汉果皂苷Iva Mogroside IVa 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠雌二醇受体(ER)ELISA检测试剂盒MouseEsadiolreceptor,ER 96T/48T 异罗汉果皂苷 V isomogroside V 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒 ,英文名: ER ELISA Kit 盐酸青藤碱 Sinomenine HCl 质量规格:>98%,BR
小鼠雌激素受体α(ERα)ELISA试剂盒 ,英文名: ERα ELISA Kit 拓扑替康 Topotecan 质量规格:美国进口
人胞浆免疫球蛋白(CIg)ELISA检测试剂盒Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 96T/48T 15-酮基氟前列醇异丙酯 15-keto Fluprostenol isopropyl ester 质量规格:美国进口
大鼠卵0脂胆酰基转移酶(LCAT)免疫试剂盒 Rat Lecithin Cholesterol Acylansferase,LCAT ELISA Kit 曲唑酮盐酸盐-d6 Trazodone-d6 Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatOsteocalcin(OT)ELISAKit大鼠骨钙素(OT)ELISAKit规格:96T/48T N-氧基曲唑酮 Trazodone N-Oxide 质量规格:美国进口
酵母双杂交系统细胞转化试剂盒20/50 4'-羟基盐酸曲唑酮 4'-Hydroxy Trazodone HCl 质量规格:美国进口
ELISAKitMAPK人原激活的蛋白激酶/MAP激酶规格:48T/96T 盐酸伐伦克林标记15N3 Varenicline Hydrochloride Labeled 15N3 质量规格:美国进口
小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒 ,英文名: E ELISA Kit 内酰胺伐伦克林 Varenicline Lactam 质量规格:美国进口
大鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA检测试剂盒Ratosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit 96T/48T 羟基伐伦克林 Hydroxy Varenicline 质量规格:美国进口
人β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒 human Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit N-甲酰伐伦克林 N-Formyl Varenicline 质量规格:美国进口
英文名称MouseVEGF-CELISAkit小鼠血管内皮细胞生长因子-C(VEGF-C)ELISAkit规格:96T/48T N-葡萄糖苷伐伦克林 Varenicline N-Glucoside 质量规格:美国进口
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罗汉果皂苷Iva Mogroside IVa 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠雌二醇受体(ER)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
异罗汉果皂苷 V isomogroside V 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠雌二醇受体(ER)ELISA检测试剂盒MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit 96T/48T
盐酸青藤碱 Sinomenine HCl 质量规格:>98%,BR 小鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒 ,英文名: ER ELISA Kit
盐酸青藤碱(标准品) Sinomenine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒 ,英文名: E ELISA Kit
脱氧核糖核酸钠(小牛胸腺) DNA.Na 质量规格:进分sigmaD1501 小鼠雌激素受体α(ERα)ELISA试剂盒 ,英文名: ERα ELISA Kit
核糖核酸(酵母) RNA 质量规格:>90%,BR 小鼠雌激素受体β(ERβ)ELISA试剂盒 ,英文名: ERβ ELISA Kit