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一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | UMR106-LUC |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
犬胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)免疫试剂盒 Dog TSLP ELISA Kit 13X分子筛(3-5mm,球形) Molecular sieves Type 13X 质量规格:3-5mm,球形
犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫试剂盒 Canine Thymosin α1 ELISA Kit 13X分子筛(2-3mm,球形) Molecular sieves Type 13X 质量规格:2-3mm,球形
犬血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 Dog angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit 3A分子筛(20-40目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:20-40目,气相、液相色谱柱
犬血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Dog angiotensin Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 3A分子筛(40-60目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:40-60目,气相、液相色谱柱
犬血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒 Dog angiotensin I conveing enzyme(peptidyl-dipeptidase A)1(ACE)ELISA kit 3A分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:60-80目,气相、液相色谱柱
犬血管紧张素转化酶2(ACE2)免疫试剂盒 Dog Angiotensin-conveing enzyme 2,ACE2 ELISA kit 3A分子筛(80-100目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:80-100目,气相、液相色谱柱
犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒 Dog von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 分子筛3A(干燥剂用) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:干燥剂用
犬血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒 Dog serum amyloid A,SAA ELISA Kit 分子筛3A(pellets,3-5 mm) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:pellets,3-5 mm
犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)免疫试剂盒 Canine serum amyloid A2,SAA2 ELISA Kit 分子筛3A(pellets,2-3 mm) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:pellets,2-3 mm
犬血栓前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒Caninethrombusprecursorprotein,TpP 96T/48T 4A分子筛(20-40目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:20-40目,气相、液相色谱柱
人α-烯醇化酶(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)免疫试剂盒 Human ENO1 ELISA kit 17α-雌二醇-16,16,17-d3 17α-Estradiol-16,16,17-d3 质量规格:美国进口
英文名称MouseCyclinD1ELISAKit小鼠细胞周期素D1(CyclinD1)规格:96T/48T 炔雌醇-2,4,16,16-d4 Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4 质量规格:美国进口
SELDI蛋白质谱分析技术试剂盒5 炔雌醇3-硫酸盐 Ethynyl Estradiol 3-Sulfate 质量规格:美国进口
RabbitHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA试剂盒兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-羟基雌二醇 2-hydroxy Estradiol 质量规格:美国进口
小鼠补体1q(C1q)ELISA试剂盒 ,英文名: C1q ELISA Kit 乙硫异烟胺亚砜 Ethionamide Sulfoxide 质量规格:美国进口
人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA检测试剂盒HumancyclophilinA,CyPAELISAKit 96T/48T 依曲韦林-d6 Etravirine-d6 质量规格:美国进口
大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫试剂盒 Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit 依曲韦林-13C3 Etravirine-13C3 质量规格:美国进口
英文名称RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)规格:96T/48T 法莫替丁相关化合物A盐酸盐 Famotidine Related Compound A Hydrochloride 质量规格:美国进口
金黄色葡萄球菌肠毒素D(Staphylococcusaureus:eerotoxinD)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 法莫替丁相关化合物B Famotidine Related Compound B 质量规格:美国进口
ELISAKitGROγ/CXCL3/MGSA人生长调节致癌基因γ规格:48T/96T 非那西丁-乙氧基-2-13C Phenacetin-ethoxy-2-13C 质量规格:美国进口
13X分子筛(2-3mm,球形) Molecular sieves Type 13X 质量规格:2-3mm,球形 犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫试剂盒 Canine Thymosin α1 ELISA Kit
3A分子筛(20-40目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:20-40目,气相、液相色谱柱 犬血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒 Dog angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit
3A分子筛(40-60目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:40-60目,气相、液相色谱柱 犬血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒 Dog angiotensin Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
3A分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:60-80目,气相、液相色谱柱 犬血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒 Dog angiotensin I conveing enzyme(peptidyl-dipeptidase A)1(ACE)ELISA kit
3A分子筛(80-100目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:80-100目,气相、液相色谱柱 犬血管紧张素转化酶2(ACE2)免疫试剂盒 Dog Angiotensin-conveing enzyme 2,ACE2 ELISA kit
分子筛3A(干燥剂用) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:干燥剂用 犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒 Dog von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
分子筛3A(pellets,3-5 mm) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:pellets,3-5 mm 犬血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒 Dog serum amyloid A,SAA ELISA Kit
分子筛3A(pellets,2-3 mm) Molecular sieves, 3 Å 质量规格:pellets,2-3 mm 犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)免疫试剂盒 Canine serum amyloid A2,SAA2 ELISA Kit
4A分子筛(20-40目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:20-40目,气相、液相色谱柱 犬血栓前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
4A分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱) Molecular sieves, 4 Å 质量规格:60-80目,气相、液相色谱柱 犬血栓前体蛋白(TpP)免疫试剂盒 Canine thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit